应用案例

  • 应用案例(质量光度计-MP):质量光度计测量SARS-CoV-2

    质量光度计量化了溶液中生物分子的质量分布。它在分析寡聚体状态和量化蛋白质-蛋白质相互作用方面的作用被用于研究突发SARS-CoV-2病毒的棘突蛋白及其与ACE2受体的相互作用,ACE2受体被认为是该病毒进入人类细胞的主要途径。我们证明了重组产生的SARSCoV-2棘突外结构域形成了一个明确的三聚体。使用ACE2作比较,可以确定与每个三聚体一个ACE2结合相对应的不同组分。这表明棘突蛋白内ACE2与RBD的功能结合,可获得RBD的向上或向下构象的混合组分。

    37 2022-08-23
  • 应用案例(质量光度计-MP):质量光度计测量蛋白质的变性

    质量光度计量化了溶液中生物分子的质量分布。在自然条件下,已确定其用于分析生物样品的纯度、完整性和功能。然而,其在变性条件下的性能尚未得到彻底评估。在本申请说明中,我们证明质量光度计是研究低聚物蛋白质变性(去折叠)和复性(再折叠)的有用工具。通过化学变性破坏蛋白质的天然结构可以深入了解蛋白质和复合物的结构和稳定性。尿素和盐酸胍(GdnHCI)等化学变性剂通过改变蛋白质疏水残基暴露于周围水溶液中,促进蛋白质的变性(去折叠)。虽然化学变性在生物化学研究中已经用了几十年,但由于其涉及大量分析技术,操作成本高,灵敏度低,数据分析和解释太复杂,因此对变性(去折叠)和复性(再折叠)的监测仍然具有挑战性。

    46 2022-08-23
  • 应用案例(质量光度计-MP):质量光度计测量腺病毒AAVs的空壳与负载

    腺相关病毒(AAVs)已被批准用于基因治疗——将遗传物质输送到靶组织。制备AAV介导的基因疗法的一个挑战是质量控制,尤其是空壳与负载(全衣壳)的比例。在这里,我们展示了如何在AAV血清型中使用质量光度计,以可靠且可重复地测量AAV样品纯度和空壳/负载比率。这些测量可以在几分钟内用少量样品进行。目前正在寻求以AAVs为运载工具的基因疗法,以治疗帕金森氏症、遗传性失明、脊髓肌萎缩和血友病等疾病,取得了有希望的结果和良好的安全性。尽管在纯化过程中取得了进展,但由于缺乏快速可靠的方法来评估AAV的完整性、成功包装的遗传物质的数量以及宿主细胞和辅助病毒中蛋白质和核酸污染物的存在,AAV的生产受到阻碍。有缺陷或空的AAV是不受欢迎的,因为它们可以在治疗过程中竞争细胞受体,降低治疗效果,并导致意外的免疫反应。

    80 2022-06-24
  • 应用案例(质量光度计-MP):质量光度计表征蛋白质相互作用的平衡态

    质量光度计定量了溶液中生物分子的质量分布。蛋白质-蛋白质相互作用和蛋白质复合物形成通常是涉及多个成分的多步骤反应。质量光度计是一种新的分子光谱分析方法,它可以监测复杂的平衡反应的形成,并评估化学环境或蛋白质浓度的变化如何影响平衡。分子光谱法以单分子方式直接测量样品中所有蛋白质群体的相对浓度。从DNA复制到细胞周期控制,蛋白质-蛋白质相互作用对几乎每一个细胞过程都至关重要。由于蛋白质之间的相互作用主要是非共价的,它们通常以平衡状态存在。评估系统在扰动后如何恢复平衡,可以深入了解反应动力学,而相互作用亲和力是通过测量平衡时每个组分的相对浓度来确定的。然而,当感兴趣的系统包括低浓度下的多个反应或组分时,蛋白质-蛋白质相互作用的研究可能变得复杂。在这些条件下,体积或平均测量值迅速下降。相比之下,质量光度计是一种单分子分析技术,因此它可以直接测量样本中所有组分的分子质量和相对丰度。在这里,我们使用质量光度计研究形成四聚体的重组蛋白的低聚过程。

    86 2022-06-24
  • 应用案例(类器官培养仪-HUMIMIC): 肝脏类器官的培养并接种到多器官芯片平台(MOC)(编码:SOP-007)

    该 SOP 描述了由肝癌细胞系(HepaRG)和原代人肝星状细胞 (SteCs) 组成的肝球体的培养,形成肝脏类器官。此外,还描述了将肝脏类器官整合到 MOC 中,可以与其他类器官串联起来共培养。肝球体的生长大约需要 3 小时。从 384 孔微孔板中去除肝球体大约需要 2~5 小时,具体取决于所需的肝球体数量。将肝球体整合到 MOC 中至少需要 1 小时,这也取决于所需 MOC 的数量及所需的肝球体数量。应计算准备细胞培养的额外时间(约 1 周)以及 MOC 的交付时间。

    122 2022-05-24
  • 应用案例(类器官培养仪-HUMIMIC):人胰岛和肝脏类器官在芯片上的功能串联共培养:一种新的人2型糖尿病体外模型

    我们迫切需要研究疾病和药物治疗效果的人体体外生理模型作为更相关的工具,以确定新的药物靶点和治疗方法。我们开发了一种基于胰岛素和葡萄糖调节的人胰岛-肝脏串联共培养的微流控双器官芯片模型。我们已经建立了一种有力的人胰岛和肝脏类器官串联共培养的方法,在无胰岛素的培养基中维持功能长达15天。在不同的葡萄糖耐受实验中,胰岛在葡萄糖负荷下释放胰岛素,证实了功能串联促进了肝脏对葡萄糖的吸收。串联培养维持餐后循环中的葡萄糖浓度,而两种单独培养的类器官中葡萄糖水平保持偏高。因此,分泌到循环中的胰岛素刺激了肝脏类器官对葡萄糖的摄取,而后者,在没有胰岛素的情况下,并没有有效地消耗葡萄糖。随着葡萄糖浓度的降低,胰岛素分泌减少,表明肝脏和分泌胰岛素的胰岛之间存在一个功能反馈回路。最后,实验室间验证了稳定性和重现性。该模型的进一步发展,使用诱导糖调节受损的工具,应该提供一个独特的体外系统模拟人类2型糖尿病。

    64 2022-05-24
  • 应用案例(类器官培养仪-HUMIMIC):用于长时间药物检测的神经球和肝脏类器官培养物的多器官串联共培养

    目前用于药物开发的体外和动物试验未能模拟人体全身器官的复杂性,因此往往不能准确预测药物毒性,导致临床研究中的高损耗率。人类和实验室动物之间的系统发育距离是巨大的,这影响了神经保护药物疗效的动物数据的可转移性。因此,许多在动物身上显示出希望的神经保护治疗在转移到人类身上时并不成功。我们提出了一种多器官串联共培养芯片,能够在组合介质电路中维持来自不同细胞来源的3D组织,这弥补了系统和人体测试的空白。在多器官串联共培养芯片中,将人人工肝类器官和人神经球置于流体中两周的稳态类器官串联共培养成功地证明了其长期性能。在两周的毒性试验中,重复暴露于两种不同浓度的神经毒性2,5-己二酮物质,可诱导神经球和肝脏类器官内的高凋亡,培养液中乳酸脱氢酶活性显著增加。对2,5-己二酮类器官串联共培养的主要发现是,不仅可以区分两种不同剂量的毒性谱,而且与多器官芯片中各自的单类器官培养相比,类器官串联共培养对该物质更敏感。因此,我们在这里提供了一种新的体外工具,可以在未来的临床研究中更准确地预测药物的安全性和有效性。

    48 2022-05-24
  • 应用案例(细胞计数仪-SOL COUNT):全自动半导体式细胞计数仪如何计算细胞存活率

    Sol Inc. 是一家具有创新技术的韩国生物科技公司,公司生产半导体无透镜传感器。 Sol Inc 开发了一种技术,用于评估和校准生物和医疗设备产品的半导体传感器和传感器模块,该技术基于一种只使用半导体而不使用光学透镜的无透镜光学传感器。SOL COUNT全自动细胞计数仪是一种可以同时对多种细胞类型进行自动计数的新技术。SOL COUNT全自动细胞计数仪采用无透镜LED光学和CMOS传感技术,快速准确地测量细胞总数、活细胞和死细胞数量,并且实施快速存储和传输数据。此外,还可以同时测量两种细胞。

    144 2022-01-16
  • 应用案例(质量光度计-MP):质量光度计在测量蛋白-蛋白相互作用方面的应用

    生物分子间的相互作用在每个生物过程中都起着关键的作用。质量光度法是在低浓度下定量相互作用的理想选择,其主要优点是它可以检测溶液中存在的生物复合物。分子质量是一个最常用的数据,可以反应出生物分子和生物分子复合物的多种性质,包括同质性,结构完整性和活性的。这意味着质量光度计不仅可以用于简单的纯度测定,还可以用于活性和结合的评估,提供的多种数据,与其他技术验证结果也保持一致。

    299 2021-11-29
  • 应用案例(质量光度计-MP):质量光度计在测量SARS-CoV-2方面的应用

    质量光度计定量了溶液中生物分子的质量分布。它在分析低聚态和定量蛋白-蛋白相互作用方面的用途被用于研究突发性SARS-CoV-2病毒的刺突蛋白及其与ACE2受体的相互作用,这被认为是病毒进入人类细胞的主要途径。当前SARS-CoV-2大流行的出现引发了大量与冠状病毒进入宿主细胞机制有关的功能和结构研究。刺突糖蛋白通过与人血管紧张素转换酶2 (ACE2)紧密相互作用,形成从病毒表面突出的同源三聚体,作为刺突蛋白的功能受体。该蛋白随后被宿主蛋白酶裂解,从而通过广泛的不可逆构象变化激活该蛋白进行膜融合。

    56 2021-11-29